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當(dāng)前位置:首頁(yè)新聞中心pG6質(zhì)粒簡(jiǎn)介,pG6質(zhì)粒說(shuō)明

pG6質(zhì)粒簡(jiǎn)介,pG6質(zhì)粒說(shuō)明

更新時(shí)間:2013-03-12點(diǎn)擊次數(shù):1638

pG6質(zhì)粒是噬菌體顆粒載體,是為融合蛋白的單價(jià)展示設(shè)計(jì)的。來(lái)自輔助噬菌體的野生型pⅥ與噬菌體顆粒載體表達(dá)的pⅥ-cDNA的融合蛋白競(jìng)爭(zhēng)合成原始的噬菌體顆粒。在多鏈接區(qū)域除了有一個(gè)額外的SalI位點(diǎn)以外,實(shí)際上噬菌體顆粒載體pG6A、pG6B、pG6C與載體pDONG6是等同的,pDONG6允許在gⅥ的3’末端進(jìn)行eDNA文庫(kù)克隆。從lac啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄可以產(chǎn)生雙側(cè)順反子mRNA:*條順反子在lacZ和gⅢ3’末端之間編碼一個(gè)融合蛋白,而第二條順反子包含了gⅥ-eDNA融合基因。gⅥ的核糖體結(jié)合位點(diǎn)控制著第二條順頃反子的翻譯,此位點(diǎn)位于gⅢ的3’末端。盡管盧-異丙基硫代半乳糖苷可誘導(dǎo)1ac啟動(dòng)子控制gⅥ-cDNA的表達(dá),但是我們已經(jīng)利用1ac啟動(dòng)子的滲漏性(在缺乏葡萄糖的條件下)來(lái)指導(dǎo)噬菌體展示的gⅥ融合蛋白的表達(dá)。

用于噬菌體展示編碼cDNA產(chǎn)物的pG6家族載體環(huán)狀圖(a)和序列(b)。
此載體的原型是插人M13噬菌體基因Ⅵ的pUCll9載體。此系列的pG6載體能夠在基因Ⅵ閱讀框下游SfiⅠ與NotⅠ酶切之間的cDNA的大量克隆。該圖已得到Nature America公司的授權(quán)

 

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